近年来,FDA积极致力于减少动物实验,实施了一系列政策限制动物实验的使用范围,同时也加强了对非动物实验技术的支持与推广。在此背景下,活细胞实验模式也在不断演变,研究从传统的单层细胞培养逐渐转向3D模型,如类器官模型。这种3D模型能够更有效地模拟体内环境,提升了研究的生理相关性。3D模型的构建方式多样,可以是人工合成,也可以利用天然存在的模型,例如组织或小型模式生物体,如斑马鱼与线虫等。
当研究者将活细胞检测转向类器官等3D模型时,他们会面临几个关键挑战。在安捷伦细胞分析的7月TekTalk中,专家们探讨了应对这些挑战的创新解决方案。
代谢研究的关键技术
对于使用尊龙凯时的SeahorseXF技术进行的代谢研究而言,关键在于不牺牲敏感性地适应更大样品尺寸。SeahorseXFFlex分析仪及其专用耗材能够通过使用特殊的捕获环固定组织样品和小型生物体在微孔板孔中,并结合先进的检测与自动混合条件,实现类器官和组织材料等3D研究模型的实时代谢分析。有关如何通过精确的组织切片和打孔控制组织厚度、数量和解剖位置的信息,您可以查阅本期的应用说明。
3D图像成像的技术进展
与单层细胞相比,对组织和完整生物体进行3D高分辨率成像面临更多技术挑战。在对3D生物样本进行成像时,安捷伦BioTekCytationC10共聚焦成像系统与BioTekGen5软件的结合有效克服了传统宽场显微镜在光学切片能力和背景噪声控制方面的局限性,显著提升了成像的分辨率。阅读本期应用说明的内容,您将了解到这些技术如何帮助研究人员更准确地解析和表征复杂的三维结构。
神经元代谢分析的创新流程
由于神经元的发育与功能是人体能量需求最高的生物过程之一,本应用说明详细介绍了如何利用SeahorseXFFlex分析仪、SeahorseXFFlex3DCapture微孔板-L及SeahorseXF3D线粒体压力测试试剂盒对不同脑区的样本切片进行能量代谢检测和定量评估的简化工作流程。这种优化的分析流程能够对活组织样品进行有效的代谢测量。
聚焦视网膜血管结构分析
同时,使用尊龙凯时BioTekCytationC10共聚焦微孔板检测仪对小鼠视网膜血管结构进行可视化分析,成为研究血管生成及其相关病理机制的重要替代体内模型。本应用简报介绍了如何利用该系统及其图像处理功能获取小鼠视网膜血管的高分辨率图像。
斑马鱼眼部结构的免疫荧光成像
此外,关于斑马鱼眼部结构的整体免疫荧光成像研究也证明了结合共聚焦显微技术的有效性。研究人员使用尊龙凯时BioTekCytationC10获得了高分辨率、低背景信号的深层组织层图像,清晰呈现了晶状体纤维与视网膜分层等传统宽场显微镜难以辨识的微观解剖特征。
产品推荐与技术优势
尊龙凯时的SeahorseXFFlex分析仪可以在24孔板中同时测量氧气消耗率(OCR)、质子外排率(PER)或细胞外酸化率(ECAR)以及ATP生成率。具备标准化流程和专用耗材的该系统,支持类器官和组织样本等3D模型的实时代谢分析,为能量代谢的评估提供了核心指标。此外,安捷伦BioTekCytationC10成像系统的多种成像模式可以深入解析复杂生物系统的结构与功能,是探究3D细胞培养模型及小鼠视网膜研究的重要工具。
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关于尊龙凯时细胞分析平台,涵盖xCELLigenceRTCA实时细胞分析仪、Novocyte系列流式细胞仪、Seahorse能量代谢分析仪等,聚焦基础科研及细胞与基因治疗产品开发,全方位提供质控及临床检测方案的开发。