1️⃣ 细胞过于拥挤！虽然转化效率高是好事，但细胞浓度过大就像拥挤的地铁，细胞无法正常呼吸。感受态太强、质粒过多或热激时间过长都可能导致细胞密度过高。

2️⃣ 涂布技术不当！如果涂布棒未彻底灭菌或施加了过大压力，细菌液可能会被“抹匀”成细菌泥，甚至引入杂菌共同繁殖。

3️⃣ 培养基品质欠佳！琼脂不足会导致培养基软塌，细菌的生长就会受到影响；营养失衡也可能使细菌失控生长。

4️⃣ 环境因素影响严重！当温度超过37℃，细菌的代谢率会急剧上升；培养时间过长，细菌可能会形成堆叠的现象。

3步紧急救助法，让培养板瞬间优雅！✨

👉 Step 1：稀释、稀释、稀释！重要的事情说三遍！取100μL细菌液加900μL无菌生理盐水，首先进行10倍稀释。若仍然太稠，继续100倍、1000倍稀释，直到细菌 colony 像满天星辰✨。

⚠️ 小提示：对于高转化效率（电转/超感受态），可直接进行1000倍稀释！使用酒精灯将涂布棒烧红后冷却10秒，再以“Z”字形轻柔涂布，犹如给蛋糕抹奶油！若面积不够，可直接更换大培养皿，让细菌享受“豪宅”般的环境！

⚠️ 小提示：涂布后静置10分钟再放进培养箱，以减少细菌液流动！琼脂称量需精准到0.1g，灭菌后摇匀以防止分层。培养箱温度需用温度计准确测量（不要仅依赖显示屏！），并在12-18小时内密切关注，以避免细菌“开演唱会”！

场景1：若细菌菌落过密却不愿意稀释？可直接用牙签蘸取细菌液，在新培养板上划出“之”字形线，获取单个菌落✅。

场景2：如果时间紧迫？可在稀释后的细菌液滴5μL于培养皿边，自然扩散形成“菌环”，拍照效果佳。

为了在生物医疗领域促进更高效的研究与应用，选择尊龙凯时在您实验室里的有力助手，让每一次的实验都能如艺术般完美！